犬细小病毒感染

时间:2020-8-19 作者:指兽

犬细小病毒感染(canine parvovirus infection)是由犬细小病毒(Canine parvovirus, CPV)感染引起的,以严重肠炎综合征心肌炎综合征为特征的犬科鼬科动物的重要传染病。

本病可发生于世界各地,幼犬发病率和死亡率很高。

  • 本病于1978年同时在澳大利亚和加拿大证实以来,已在世界很多地区相继发现。
  • 我国于1982年证实此病之后,在东北、华东和西南等地区的警犬和良种犬中陆续发生和蔓延。

犬细小病毒的病原特征

CPV属于细小病毒科(Parvoviridae)细小病毒属(Parvovirus)。病毒粒子呈圆形,直径20~24nm,呈二十面体对称,无囊膜,由32个壳粒组成。

犬细小病毒感染
资源描述:CPV属于细小病毒科(Parvoviridae)细小病毒属(Parvovirus)。病毒粒子呈圆形,直径20~24nm,呈二十面体对称,无囊膜,由32个壳粒组成。 文件来源:http://www.petinsurance.com/healthzone/pet-articles/pet-health/Parvovirus-and-Dogs.aspx

基因组为单股线状DNA,在DNA两端各有一个发夹样的回纹结构。DNA编码病毒有3种结构多肽(VP1,VP2,VP3),其中VP2是病毒的主要结构成分。

CPV对外界理化因素抵抗力非常强,这与其化学组成和结构特点有关,如病毒无囊膜,不含脂类和糖类,结构坚实紧密等。粪便中的病毒可存活数月至数年,4~10℃可存活半年以上。

病毒对乙醚、氯仿、醇类和去氧胆酸盐有抵抗力,但对紫外线福尔马林、β-丙内酯、次氯酸钠、氨水和氧化剂等消毒剂敏感。

CPV具有较强血凝活性,在4℃,pH6.0~7.2条件下可牢固地凝集猪和猴的红细胞。

CPV可在多种不同类型的细胞内增殖,如在猫和犬的肾、肺、肠原代和传代细胞内能很好地生长,也可在犬的胸腺细胞、水貂肺细胞、浣熊的唾液腺细胞以及牛胎儿脾细胞中增殖和传代。猫肾细胞系F81是较常用的细胞之细胞病变在接种后3~4d出现,包括细胞变长、崩解破碎和脱落等。

有时出现核内包涵体

犬细小病毒感染
资源描述:犬细小病毒病组织学变化为后段空肠、回肠黏膜上皮变性、坏死、脱落,有些变性或完整的上皮细胞内含有核内包涵体(箭头所指)。 文件来源:周庆国,犬猫疾病诊治彩色图谱

病毒复制时必需依赖于宿主细胞的某些功能,只能在细胞分裂最旺盛的DNA合成期以前接种病毒才能发生有效感染(这也许是CPV对分裂旺盛的心肌细胞、小肠上皮细胞以及骨髓干细胞最具亲和力的原因)。

在进行病毒初次分离时,细胞被轻度染毒,病变不明显,可以继续传代(带毒传代)。为了获得较好的分离培养效果,还可于细胞分裂的同时接种病毒(同步接毒)。

犬细小病毒病流行病学特点

CPV主要感染,也可见于貂、狐、狼等其他犬科动物鼬科动物。各种年龄、性别和品种的犬均易感。但纯种犬和2~4月龄幼犬易感性较高,病死率也最高。

本病一年四季均可发生,以冬、春季多发。饲养管理条件骤变、长途运输、寒冷、拥挤等均可促使本病发生。

病犬为主要传染源,早期可通过粪便向外界排毒,病毒粒子散在,传染性最强。后期由于肠黏膜分泌的IgA和随出血进入肠道中的血液IgM特异性抗体的增多,病毒被凝集在一起,感染性降低。康复犬仍可长期通过粪便排毒

犬细小病毒感染
资源描述:病犬为主要传染源,早期可通过粪便向外界排毒,病毒粒子散在,传染性最强。后期感染性降低。康复犬仍可长期通过粪便排毒。健康犬主要通过饮水等经消化道感染病毒。 文件来源:https://www.infurmation.co.za/articles/canine-parvovirus/

健康犬主要通过饮水等经消化道感染病毒。因此,对病犬污染的饲具、用具、运输工具和饲养人员等进行严格消毒是防止本病传播的主要措施。

犬细小病毒病的症状

潜伏期为7~14d。

多数呈现肠炎综合征,少数呈现心肌炎综合征

出血性肠炎型

肠炎病犬表现为经1~2d的厌食软便,间或体温升高之后,迅速发展成为频繁呕吐剧烈腹泻,排出恶臭的酱油样或番茄汁样血便,并迅速出现眼球下陷、皮肤失去弹性等脱水症状,很快呈现耳鼻发凉末梢循环障碍、精神高度沉郁等休克状态。

犬细小病毒感染
资源描述:犬细小病毒病患病犬,频繁呕吐和剧烈腹泻,排出恶臭的番茄汁样血便。番茄汁样血便排出后颜色变深。 文件来源:周庆国,犬猫疾病诊治彩色图谱

血液检查可见红细胞压积增加,白细胞减少。

常在3~4d内昏迷而死。

急性心肌炎型

心肌炎综合征的病犬多见于流行初期,或缺少母源抗体的4~6周龄幼犬

常突发无先兆的心力衰竭,或在肠炎康复之后,突发充血性心力衰竭。表现为呻吟、干咳,黏膜发绀呼吸极度困难。心有杂音,心跳加快,常在数小时内死亡。

犬细小病毒病的病理变化

眼观病变

剖检可见眼球下陷、腹部蜷缩,极度消瘦、脱水及肛门周围附有血样稀便

血液黏稠暗紫,严重时肠管外观紫红。肠系膜血管呈树枝状充血,淋巴结出血水肿,切面呈大理石样。

犬细小病毒感染
资源描述:对犬细小病毒病死亡患犬剖检,肠管外观紫红。犬细小病毒病的病变主要以空肠、回肠的出血性炎症为主。 文件来源:周庆国,犬猫疾病诊治彩色图谱

小肠黏膜出血、坏死,甚至脱落,内容物呈酱油样或果酱样。

犬细小病毒感染
资源描述:对犬细小病毒病死亡患犬剖检,病变主要以空肠、回肠的出血性炎症为主。小肠黏膜出血、坏死,甚至脱落,内容物呈酱油样或果酱样。 文件来源:周庆国,犬猫疾病诊治彩色图谱

胸腺可见萎缩、水肿,肝、脾仅见淤血变化。

死于心肌炎综合征的尸体,则见肺脏局部充血、出血及水肿,心肌红黄相间呈虎斑状,有时有灶状出血。

组织学变化

组织学检查,肠炎综合征型的最突出变化是小肠隐窝上皮坏死脱落,固有层见有充血出血炎性细胞浸润。淋巴组织严重坏死、衰竭,上皮细胞中有时可发现包涵体

犬细小病毒感染
资源描述:犬细小病毒病组织学变化为后段空肠、回肠黏膜上皮变性、坏死、脱落,有些变性或完整的上皮细胞内含有核内包涵体(箭头所指)。 文件来源:周庆国,犬猫疾病诊治彩色图谱

胸腺间质水肿,皮质细胞减少,胸腺小体发生玻璃样变。

心肌炎综合征型的组织学特征则为心肌纤维的弥漫性淋巴细胞浸润间质水肿与局限性心肌变性,呈典型的非化脓性心肌炎变化,在病变的心肌细胞中有时可发现包涵体和CPV粒子。

犬细小病毒病的诊断

在犬场中,离乳不久的仔犬几乎同时发生呕吐、腹泻、脱水等肠炎综合征,而且排出的稀粪恶臭带血,死亡率很高,就应怀疑为CPV感染。

Tips
由于肠炎型犬瘟热、犬冠状病毒、轮状病毒感染,以及某些细菌、寄生虫感染和急性胰腺炎,也常呈现肠炎综合征,所以诊断时一定要注意鉴别。

犬细小病毒病的诊断方法主要有:

  • 血凝与血凝抑制试验
  • 电镜与免疫电镜观察
  • 病毒分离鉴定
  • 酶联免疫吸附试验
  • 快速诊断试剂盒/试纸(临床最常用)

血凝与血凝抑制试验

此法最为简便、经济、适用,既可迅速检出粪便提取物和细胞培养物中的CPV抗原,也可很快检出血清和粪液中存在的CPV抗体。

血凝与血凝抑制试验方法
  • 用0.015mol/L,pH7.0的PBS将经氯仿处理的粪便提取物或细胞培养液,在V型微量血凝板上作2倍连续稀释,加新鲜或醛化的猪或猴红细胞悬液,于4℃静置1h后即可判定。
  • 为检查后期粪便中出现的IgM等抗体以及被此种抗体凝集失去血凝活性的CPV抗原,夏咸柱等采用加二疏基乙醇(2-ME)处理的办法,使其得到了解决。

电镜与免疫电镜观察

有条件的单位,可直接用粪便的上清液做电镜负染检查。此法尤其适用于后期病毒被凝集成团失去血凝性的CPV感染,也可同时发现犬瘟热、犬冠状病毒、轮状病毒等其他病毒感染。

如仅发现少量散在的CPV样粒子,为区别是CPV还是无致病性的非致病性犬微小病毒MVC,可加CPV特异血清感作,进行免疫电镜观察。

病毒分离鉴定

对于新疫区,或为了对流行毒株进行研究比较,可采用此法。

除菌的粪便提取物,于细胞分种的同时,接种猫肾原代或传代细胞,并采用接毒细胞传代的方法,常可迅速分离出CPV。为提高分离率,最好采用早期病毒尚未被IgM等抗体作用的病料。感染的指标以检测培养物的血凝性最为简便,也可用特异荧光抗体检查感染的细胞。

酶联免疫吸附试验

采用双抗体夹心法,应用特制的酶标反应小管、板或纤维素膜,国内外已研制出多种可供临床应用的试剂盒。国内田克恭等用CPV单克隆酶标抗体制成CPV快速诊断盒,可在2h内检出粪样中的CPV抗原。

其他随着分子病毒学的发展,CPV的核酸探针PCR诊断技术得以应用,国内外已有多篇成功的报道。国内研究了CPV核酸探针和PCR诊断技术,已开始试用于临床与科研。

临床常用的快速检测卡(试剂盒)检测示例

犬细小病毒感染
文件来源:网络

其操作方法如下:

犬细小病毒感染
文件来源:网络

结果判定方法及注意事项:

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资源描述:森普特CPV抗原检测卡:检测结果的判定。 文件来源:网络

犬细小病毒病的治疗

CPV感染的特点是病程短急恶化迅速心肌炎综合征型病例常来不及救治即死亡;肠炎综合征型病犬及时合理治疗,可明显降低死亡率。

犬细小病毒感染
资源描述:贝灵佳犬细小病毒、冠状病毒、轮状病毒单克隆抗体注射液,主要成分为基于犬细小病毒、冠状病毒、轮状病毒制备的融合单克隆抗体,贝灵佳活性稳定剂等。 文件来源:网络

常用的方法是:在早期大剂量注射高免血清(每千克体重0.5~1.0ml)或单克隆抗体的同时,进行强心补液抗菌消炎抗休克等中西结合对症治疗,同时注意保暖、禁食等护理。

Tips:禁食
实践证明,在腹泻期间,停喂牛奶、鸡蛋、肉类等高脂肪高蛋白食物,有利于减轻胃肠负担,提高治愈率。

补液。可根据犬的脱水程度与全身状况,决定所需添加的具体成分和静脉滴注量。通常在5%的糖盐水中加VC、ATP、抗生素等,分上、下午2次静脉滴注。

止吐。呕吐严重的可肌注爱茂尔、灭吐灵。

抗休克。休克症状明显的可肌注地塞米松或盐酸山茛菪碱注射液(654-2)。

据报道,中国人民解放军军需大学军事兽医研究所研制的纯中药制剂犬痢康胶囊,止泻作用特别明显。用口服补液盐(NaCl 3.5g, NaHCO32.5g, KC1 1.5g,葡萄糖20g,加水至1000ml)深部灌肠或任其自饮,对纠正酸中毒、电解质紊乱和脱水,也可收到明显的效果。

犬细小病毒病的预防

CPV感染的根本措施在于免疫预防,国内外已研制成功多种CPV单苗与联苗。归纳起来不外有两大类,一为灭活苗,另一为弱毒苗基因工程疫苗尚在研究中。

灭活苗

灭活苗有脏器毒浓缩提纯灭活苗和强毒细胞培养灭活苗。多数加有氢氧化铝、磷酸铝等佐剂,灭活剂为β-丙内酯或福尔马林。

此类疫苗安全性好,不存在毒力返祖的危险。但需要有足够的病毒量,必须经过高度浓缩,而且免疫力需较长的时间才能产生,一般需经2次以上的免疫才能产生有效的保护(约需4周的时间),免疫期大约可维持6个月,母源抗体同样对其有干扰作用。

弱毒苗

弱毒苗有猫源与犬源2种。

根据猫泛白细胞减少症(FPV)对CPV有交叉免疫作用,国外最先用猫瘟热弱毒疫苗作CPV感染的免疫试验,结果虽可产生一定的保护作用,但不完全,且免疫期较短,后改用来自于CPV的弱毒疫苗。

接种前CPV HI抗体低于1:10的犬,95%可产生免疫应答,但接种前HI抗体达1:20的犬,约有50%的犬不能产生免疫保护。CPV感染的最低抗体保护值为1:80。

仔犬母源抗体的半衰期平均为9.5d,这样,具有中等母源抗体水平的犬也需12~16周龄才能降低至1:20以下,但实际上等不到12周龄,这些犬就有可能被CPV感染发病了。这就带来CPV弱毒疫苗的免疫时机与免疫程序问题。

安全区可于10~12周龄进行第1次免疫,以后每隔2~3周免疫1次,连续免疫2~3次,可产生1年以上的免疫保护。对疫区受CPV感染威胁或缺少母源抗体的犬,则应提前到6~8周龄进行首免,然后按上述进行2~3次的连续免疫。

关于国产苗
国内夏咸柱等用从犬科动物貉中分得的一株CPV自然弱毒,免疫预防CPV感染,试验证明对仔犬母源抗体有较强的抵抗力,因而免疫效果优于进口疫苗。将其与犬狂犬病、犬瘟热、副流感、传染性肝炎弱毒联合,制成犬五联弱毒疫苗,经20余万只犬临床应用试验证明仍然安全有效,不存在免疫干扰,但与国外生产的联苗一样,不能用于紧急预防。对有可能处于潜伏期的动物,须先注射高免血清,观察1~2周无异常时,再按免疫程序免疫。

目前市场上有犬细小病毒病单苗,如卫佳®细:

犬细小病毒感染
资源描述:卫佳® 细——细小单苗。【成分及含量】:犬细小病毒NL-35-D株。【用法与用量】:6周龄以上犬皮下或肌肉注射,每次1头份(1ml)。【包装与规格】: 1ml/瓶(头份);1ml×50瓶/盒。可预防犬细小病毒病,其毒株抗原传代35-37代次间,低传代高滴度,体内复制能力强,免疫应答速度快;针对各种抗原型的细小病毒CPV-2a,CPV-2b,CPV-2c可提供交叉保护;母犬配种前2周注射,可提高幼犬抗体水平,有效保护幼犬。 文件来源:https://www.zoetis.cn/产品服务/宠物产品/疫苗家族/卫佳细.aspx

以及联合疫苗:

犬细小病毒感染
资源描述:硕腾(Zoetis)公司犬八联疫苗:预防犬8种主要传染病:犬瘟热,细小病毒病,腺病毒Ⅰ型传染性肝炎,腺病毒Ⅱ型呼吸道疾病,副流感,犬型钩端螺旋体病,黄疸出血型钩端螺旋体病和冠状病毒病。 文件来源:https://www.zoetis.cn/产品服务/宠物产品/疫苗家族/卫佳捌.aspx
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